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Descripción
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| Rhizobium leguminosarum (Rl) es una alfa-proteobacteria de suelo capaz de establecer una simbiosis diazotrófica con diferentes leguminosas. En el establecimiento de la simbiosis intervienen distintos factores, entre los cuales se encuentran los sistemas de comunicación intercelular conocidos como quórum sensing (QS). Mediante este sistema, las bacterias actúan de manera coordinada en respuesta a cambios en la densidad de población a través de la producción y detección de señales extracelulares. En el caso de la cepa Rl UPM791, trabajos anteriores realizados en el grupo han descrito dos sistemas funcionales de regulación por QS mediados por señales de tipo Acil Homoserina Lactonas (AHLs): el sistema rhiRI, localizado en el plásmido simbiótico, que sintetiza las moléculas C6-HSL, C7-HSL y C8-HSL; y el sistema cinRI, localizado en el cromosoma, que produce la señal de mayor tamaño, 3-OH-C14-HSL. Con el fin de estudiar el papel de los sistemas de QS en la simbiosis Rhizobium-leguminosa, se han realizado ensayos de competitividad por la nodulación de la raíz de guisante por las cepas Rl UPM791 y Rl 3841. Para analizar el efecto de la eliminación de las señales de QS se ha empleado el gen aiiA, que expresa constitutivamente una enzima lactonasa capaz de degradar las señales producidas por la bacteria. Para identificar los nódulos producidos por cada una de las cepas se han construido derivadas de las mismas mediante la introducción de dos marcadores, gusA y celB, que expresan constitutivamente una enzima ?-glucuronidasa y una ?-galactosidasa termoestable, respectivamente. En estos ensayos se enfrentaron cepas derivadas de Rl UPM791 y Rl 3841 con los marcadores de los genes anteriormente citados, productoras de AHLs, y cepas derivadas de las mismas, pero desprovistas de AHLs. En este trabajo también se analiza la compleja regulación de los sistemas de QS existentes en Rl UPM791, en la que participan el plásmido simbiótico (que contiene rhiRI) y también el plásmido pUPM791d. Cuando este último plásmido no está presente, desaparece la señal 3-OH-C14-HSL, indicando la existencia de un tipo de regulación dependiente de dicho plásmido sobre el sistema cromosómico cinRI. El análisis de fusiones génicas demuestra que la sintasa cinI presenta su propio promotor aguas abajo del regulador cinR, y su expresión se induce significativamente en ausencia de pUPM791d, lo que sugiere la existencia de una regulación a nivel postranscripcional. Con objeto de completar estos análisis, se están construyendo mutantes simples en las sintasas y reguladores de los sistemas de QS en fondos genéticos que difieren en el contenido plasmídico de la bacteria. Adicionalmente, se está llevando a cabo la obtención, el cierre y el análisis de la secuencia genómica de Rl UPM791, así como el estudio de los mecanismos de transporte existentes para las señales producidas por dicha cepa. | |
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Internacional
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No |
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Nombre congreso
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XXII Congreso Nacional de Microbiología SEM |
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Tipo de participación
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960 |
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Lugar del congreso
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Salamanca |
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Revisores
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Si |
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ISBN o ISSN
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000-000-000-0 |
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DOI
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Fecha inicio congreso
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11/07/2011 |
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Fecha fin congreso
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14/07/2011 |
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Título de las actas
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Libro de resumenes |