Descripción
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Antecedentes: El polen de fresno (Fraxinus excelsior) es una importante fuente alergénica en zonas cálidas de Europa. La profilina y polcalcina son 2 panalérgenos implicados en reactividad cruzada. Objetivos: Clonar y producir Fra e 2 (profilina) y Fra e 3 (polcalcina) como alérgenos recombinantes. Comparar sus propiedades inmunológicas con sus formas naturales del polen de fresno. Métodos: El RNA total de polen de fresno se utilizó como molde para obtener los cDNAs específicos de ambos panalérgenos. Dichos cDNAs se clonaron en el vector de expresión pET11b y se transformaron células de Escherichia coli BL21(DE3). Las proteínas se caracterizaron mediante dicroísmo circular, espectrometría de masas, inmunodetección en membrana y ELISA utilizando anticuerpos policlonales frente a profilina y polcalcina y sueros de pacientes alérgicos al polen de fresno. Resultados: Las secuencias de aminoácidos de la profilina y polcalcina de polen de fresno presentaban una identidad de secuencia elevada con alérgenos homólogos. Dichos alérgenos se expresaron como proteínas recombinantes independientes y se purificaron a homogeneidad. Los valores de estructura secundaria fueron similares a los de otros miembros de estas familias. Las propiedades alergénicas de los alérgenos recombinantes resultaron ser equivalentes a los de sus homólogos naturales del polen. Conclusiones: Los alérgenos recombinantes Fra e 2 y Fra e 3 podrían usarse en diagnóstico clínico para determinar los niveles de IgE específicos para profilina y polcalcina en los sueros de los pacientes sensibilizados al polen de fresno, facilitando así la identificación de la fuente sensibilizante en áreas donde los pacientes presentan perfiles alergénicos complejos. | |
Internacional
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Si |
JCR del ISI
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Si |
Título de la revista
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Journal of Investigational Allergology And Clinical Immunology |
ISSN
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1018-9068 |
Factor de impacto JCR
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2,642 |
Información de impacto
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Volumen
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DOI
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Número de revista
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257 |
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